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嘔吐毒素ELISA試劑盒檢測(cè)原理及注意事項(xiàng)?

更新時(shí)間:2023-11-10      點(diǎn)擊次數(shù):788
  嘔吐毒素ELISA試劑盒檢測(cè)原理及注意事項(xiàng)?
 
  原理
 
  測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原-抗體反應(yīng)。微孔板上包被有抗抗體。加入嘔吐毒素(DON)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品、酶標(biāo)抗原和抗體后,游離的嘔吐毒素與酶標(biāo)抗原競(jìng)爭結(jié)合抗體,抗體或抗體結(jié)合物與固定在微孔板上的抗抗體再結(jié)合,沒有結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)抗原及抗體被洗去,加入TMB底物顯藍(lán)色,加入終止液后顏色由藍(lán)變黃,用酶標(biāo)儀在450nm處檢測(cè),吸光值與樣品中嘔吐毒素含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出嘔吐毒素的含量。
 
  注意事項(xiàng)
 
  1)室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫(20- 25℃)會(huì)導(dǎo)致數(shù)值偏低。
 
  2)在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥過久的情況,則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板排干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
 
  3)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和顯色液對(duì)光敏感,避免直接暴露在光線下。
 
  4)混合要均勻,洗板要干凈(包括加樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的時(shí)候都必需充分混合均勻)。
 
  5)終止液為強(qiáng)酸性物質(zhì),避免接觸皮膚。
 
  6)不要使用過了有效期的試劑盒,也不要混合使用不同批次的試劑盒,這樣會(huì)引起測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。
 
  7)試劑盒的儲(chǔ)存條件是2-8℃,切勿冷凍。
 
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